宿主细胞残留蛋白HCP详细介绍:
中国仓鼠卵巢细胞宿主蛋白酶联检测试剂盒是用来定量分析以中国仓鼠卵 巢细胞(Chinese Hamster Ovary cells,CHO)为表达细胞的生物药物中宿主蛋白 杂质的试剂盒。首先,用不同浓度的CHO标准蛋白制作一条标准曲线,然后再根 据标准曲线来分析生物药物中宿主细胞残留蛋白的含量。具体方法为:先将CHO 标准蛋白或者待测样品适当稀释后加入已包被好抗CHO宿主蛋白抗体的96孔平 板中。经过1.5小时的保温,宿主细胞蛋白与已经固定在平板上的抗体结合形成 抗原-抗体复合物。此复合物被随后加入的生物素标记的抗CHO宿主蛋白的抗体 结合并进一步形成更高级的复合物,反应45分钟后洗去未结合的物质。再加入链 霉亲合素-辣根过氧化物酶复合物,静置30分钟。因链霉亲合素可以与任何带生 物素标记的抗体相结合,从而使链霉亲合素-辣根过氧化物酶复合物连接到平板 上。接下来冲洗掉未结合的物质,加入TMB底物。固相上的酶催化底物产生颜色 反应,待颜色反应一段时间后,终止反应。用酶标仪在450 nm波长下测定其结果, 此结果能间接地反应结合到平板上的的宿主细胞蛋白数量的多少。根据CHO宿主 蛋白标准曲定量分析生物药物中宿主细胞残留蛋白的含量。
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